Mewn arbrofion adwaith cadwyn polymeras (PCR), mae pecynnu adweithyddion a samplau yn effeithio'n uniongyrchol ar gywirdeb a diogelwch canlyniadau arbrofol. Rhaid i weithdrefnau pecynnu PCR safonol lynu'n llym ag egwyddorion sterility, atal halogiad, a labelu clir. Amlinellir gweithdrefnau penodol isod.
1. Paratoi
Cyn bwrw ymlaen, gwisgwch gôt labordy, menig, a mwgwd i sicrhau amgylchedd glân (argymhellir mainc lân neu gabinet bioddiogelwch). Gwiriwch fod yr holl nwyddau traul (ee tiwbiau centrifuge, platiau PCR) yn rhydd o halogiad DNase/RNase ac yn defnyddio sterileiddwyr rhad ac am ddim Autoclaved neu Ensym -. Dylai adweithyddion (ee primers, DNA templed, ensymau, ac ati) gael eu aliquotio i mewn i ffiolau unigol er mwyn osgoi rhewi dro ar ôl tro - cylchoedd dadmer.
2. Aliquotio a labelu
Adweithyddion Aliquotio: Defnyddiwch bibed i ddosbarthu prif gymysgedd, primers, ac ati i diwbiau centrifuge neu ffynhonnau plât PCR yn unol ag anghenion arbrofol, gan ddosbarthu pob cyfrol yn gywir i'r microliter agosaf. Defnyddiwch awgrymiadau pibed tafladwy i osgoi halogi croes -.
Safonau labelu: Rhaid i bob cynwysydd gael eu labelu'n glir gyda'r enw, crynodiad, dyddiad a rhif y gweithredwr. Argymhellir labeli gwrth -ddŵr neu engrafiad uniongyrchol i atal marciau annarllenadwy.
3. Pecynnu a Selio
Ar ôl aliquotio, tynhau'r capiau tiwb centrifuge ar unwaith neu seliwch y platiau PCR (gan ddefnyddio ffilm selio gwres - neu ffilm gludiog arbenigol) i atal gollyngiadau. Ar gyfer storio tymor hir -, argymhellir gosod y pecynnu mewn bag wedi'i selio ac ychwanegu desiccant (fel gleiniau gel silica) i gynnal amgylchedd sych.
4. Storio a chludo
Ar ôl pecynnu, dylid storio adweithyddion PCR ar wahân ar - 20 gradd (term hir -) neu 4 gradd (tymor byr) i osgoi amrywiadau tymheredd. Dylid cludo cludiant mewn cynhwysydd wedi'i inswleiddio wedi'i lenwi â deunydd clustogi i atal sioc a gollwng. Ar gyfer samplau biohazardous, mae angen cydymffurfio â gofynion pecynnu bioddiogelwch o dan y Cenhedloedd Unedig 3373 neu reoliadau perthnasol.
Mae gweithdrefnau pecynnu PCR safonol yn hanfodol ar gyfer dibynadwyedd arbrofol. Gall rheolaeth aseptig lem a labelu clir leihau risgiau halogi yn effeithiol a sicrhau cywirdeb data.
